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揭秘?zé)晒舛縌-PCR檢測(cè)廣受市場(chǎng)歡迎原因
更新時(shí)間:2019-02-21   點(diǎn)擊次數(shù):1991次
   熒光定量Q-PCR檢測(cè)為何會(huì)如此受歡迎,要從兩個(gè)問題入手,個(gè)熒光定量Q-PCR是什么?熒光定量Q-PCR檢測(cè)作用是什么?弄清楚這兩個(gè)問題,就知道了!
  首先我們來分析個(gè)問題——什么是熒光定量Q-PCR?,從概念上講,熒光定量PCR全英文名為Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction,Q-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)反應(yīng)體系中未知模板進(jìn)行量化分析的方法。
  因?yàn)檫@個(gè)方法有三個(gè)優(yōu)勢(shì),分別是屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度高,所以應(yīng)用甚廣,但凡事都是兩面的,在熒光定量PCR應(yīng)用過程中,讓人棘手頭疼的問題便是污染,污染輕則導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,重則癱瘓整個(gè)實(shí)驗(yàn)室,可以說污染得以控制熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)便成功了一半。
  常見的污染形式是:熒光定量PCR反應(yīng)體系經(jīng)過不斷升降溫,液體蒸發(fā)又冷凝,PCR管內(nèi)很容易形成攜帶有大量DNA擴(kuò)增片段的氣溶膠,氣溶膠容易泄露擴(kuò)散(如打開擴(kuò)增管蓋、擴(kuò)增管破裂等)而污染實(shí)驗(yàn)室
  所以由此可見,熒光定量Q-PCR檢測(cè)存在的必要,也就是熒光定量Q-PCR檢測(cè)的作用,就是為了試驗(yàn)安全,試驗(yàn)者的人生安全。
  熒光定量Q-PCR檢測(cè)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)污染的監(jiān)控,比如可以檢測(cè)實(shí)驗(yàn)分區(qū)是否存在氣溶膠污染,監(jiān)控方法為將去離子水放置實(shí)驗(yàn)區(qū)域2-3h后,將該去離子水作為模板擴(kuò)增,去離子水可在實(shí)驗(yàn)室多點(diǎn)放置。
  熒光定量Q-PCR檢測(cè)是可以知道儀器(如離心機(jī)、移液槍把手等)表面是否被污染,用無菌棉簽蘸取去離子水擦拭儀器及試驗(yàn)臺(tái)表面,取少量液體做為模板進(jìn)行擴(kuò)增。
  同時(shí)還能檢測(cè)移液槍是否被污染,用移液槍反復(fù)吹打無污染的去離子水,將該去離子水作為模板擴(kuò)增。以及試劑是否被污染,將試劑做為陰性模板進(jìn)行擴(kuò)增。
  看完以上講解,您是不是對(duì)熒光定量Q-PCR檢測(cè)為何廣受市場(chǎng)歡迎有一定的了解了呢,如果您需要了解更多熒光定量Q-PCR檢測(cè)等相關(guān)信息,歡迎咨詢毓秀生物科技(上海)有限公司!
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