ELISA檢測可謂是免疫學反響應用到科研出產(chǎn)中更為廣泛更為靈敏的技術手段。但是在新老手操作過程中老是會泛起或大或小的題目，比如說花板，假陽性，全顯色，悉數(shù)顯色，顯色比空缺還低。研域生物研究人員一直在尋求讓ELISA試劑盒實，ELISA體系更安穩(wěn)的辦法。讓我們的客戶實驗愈加便利，削減更多操作中遇到的困擾。
ELISA檢測具體的實驗還要有鞏固的理論外也要實踐，看一下ELISA可不能夠應用到自己實驗當中去。但ELISA選用什么，要依據(jù)實驗具體來實踐。應留心以下原理：由于蛋白質與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的效果，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質一般含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白，對于生物素和脂類物質或小分子物質我們要事前對其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被辦法均勻、結實，已擴展應用于各種抗原物質的定量測定。ELISA檢測常用的包被液除了方才說到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
ELISA檢測中要注意的各個細節(jié)：
1.血清：使用不含熱源和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后 ，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
