更新時間:2024-09-26
研究某個基因的功能較常用的手段是在宿主細(xì)胞中過表達或者沉默該基因,篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。毓秀生物針對難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,建立了標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)服務(wù)體系,可為您提供過表達、干擾穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建服務(wù)。
穩(wěn)定細(xì)胞株技術(shù)原理:
慢病毒幾乎可以感染所有種類的細(xì)胞,并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組,進行長時間的穩(wěn)定表達。利用慢病毒的特性,將外源DNA克隆到具有某種抗性的慢病毒載體中并感染宿主細(xì)胞,利用載體中所含的抗性標(biāo)志進行篩選,可得到穩(wěn)定表達或沉默特定基因的細(xì)胞株。
可選細(xì)胞:干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、其它種類細(xì)胞株。
穩(wěn)定細(xì)胞株服務(wù)流程:
一、過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)株是利用慢病毒介導(dǎo)的方式,病毒感染細(xì)胞后能整合到宿主細(xì)胞的基因組并穩(wěn)定遺傳,適合在各類細(xì)胞中穩(wěn)定過量表達不同大小的外源基因。
過表達細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)包括目的基因過表達慢病毒載體構(gòu)建、病毒包裝、細(xì)胞轉(zhuǎn)染和篩選。您只需提供目的基因和需要構(gòu)建的細(xì)胞系,我們將按照您的要求完成目的基因過表達細(xì)胞株的構(gòu)建和檢測,為您提供高質(zhì)量的基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株。
二、干擾穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
shRNA干擾提供了一種經(jīng)濟、快捷、高效的抑制特異基因表達的技術(shù)手段,有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。
與化學(xué)合成siRNA和基于瞬時表達載體構(gòu)建的shRNA相比,lentivirus-shRNA克隆經(jīng)過慢病毒包裝后,可有效感染一些難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞,并且在感染后可以整合到宿主細(xì)胞的基因組,進行長時間的穩(wěn)定表達。
備注:可根據(jù)客戶需求選擇不同的熒光和抗性。
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